聚合物基質(zhì)液相色譜柱在液相系統(tǒng)中起著分離的作用,是液相色譜系統(tǒng)的核心部件之一。柱管材質(zhì)有玻璃、不銹鋼、鋁銅、peek以及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他材質(zhì)。一般細(xì)粒度的填料采用勻漿填充法裝柱,先將填料調(diào)成勻漿,在高壓泵作用下,快速將其壓入裝有洗脫液的色譜柱內(nèi),經(jīng)沖洗后備用。
結(jié)構(gòu)及主要功能:
液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。
柱管:多用不銹鋼制成,若果使用時(shí)柱壓不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。
壓帽:即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板。
密封環(huán):位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán),多為聚四氟乙烯制成,用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
篩板:位于色譜柱兩端緊貼柱管端的篩網(wǎng)狀薄片,由燒結(jié)不銹鋼或鈦合金制成,孔徑取決于填料粒度,一般為0.2~20&um。用于防止填料從柱管內(nèi)漏出。
接頭:柱兩端連接流動(dòng)相與柱管的中空環(huán)套,由不銹鋼制成。用于柱管路聯(lián)通與柱端高壓固定。
封頭:柱兩端的密封螺絲,用于保存色譜柱時(shí)封頭。
柱填料:裝填于柱管內(nèi)的固定相擔(dān)體,其直接決定了色譜柱的類型與用途,是色譜柱的核心。多為無(wú)定形或球形硅膠基質(zhì),也有環(huán)糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化鋁等基質(zhì)。用于色譜分離。
如何更好的使用聚合物基質(zhì)液相色譜柱:
1.拿到色譜柱后先閱讀說(shuō)明書,了解色譜柱的具體性能:耐受溫度、耐受PH等。以及色譜柱的沖洗和保存條件。經(jīng)過(guò)柱校測(cè)試確認(rèn)色譜柱本身沒有問(wèn)題后方可正常使用。
2.樣品充分前處理,確保樣品的潔凈;使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器,根據(jù)實(shí)際情況更換保護(hù)柱芯或?yàn)V片。
3.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。
4.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽,避免出現(xiàn)鹽析。
5.選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是PH),以避免固定相被破壞,PH過(guò)低共價(jià)鍵斷裂,鍵和相水解;PH過(guò)高硅膠溶解。
6.色譜柱使用過(guò)程中,如果壓力升高,或出現(xiàn)污染,選擇適當(dāng)?shù)臈l件沖洗或反沖。