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“反相”和“正相”的概念是液相色譜法早期提出的概念,當(dāng)時(shí)鍵合相色譜柱尚未出現(xiàn),固定相被涂覆在載體表面,極易流失,為此科學(xué)家對流動(dòng)相使用給出了合理的建議:流動(dòng)相極性與固定液極性應(yīng)具有較大差別,以減少固定液流失。固定相極性弱于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為反相色譜法,固定相極性強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為正相色譜法。盡管目前鍵合相色譜柱已成為主流,但這一概念在色譜方法開發(fā)、預(yù)測出峰順序等方面具有重要意義。
由上面的介紹可知具體的色譜方法、色譜柱屬于正相還是反相不僅取決于固定相極性,同時(shí)還取決于流動(dòng)相極性。C18(硅膠鍵合十八烷基硅烷)、C8(硅膠鍵合辛基硅烷)、PH(硅膠鍵合苯基硅烷)等色譜柱,由于固定相極性極低,比目前已知的任何流動(dòng)相的極性都要低,因而是標(biāo)準(zhǔn)的反相柱;Silica(硅膠)、NH2(硅膠鍵合氨丙基硅烷)具有較高的極性,主要用于分離帶有極性基團(tuán)的化合物,所用流動(dòng)相的極性通常低于這些固定相,因而是標(biāo)準(zhǔn)的正相柱。CN(硅膠鍵合腈丙基)的極性適中,當(dāng)流動(dòng)相極性超過CN時(shí),它屬于反相柱,反之則是正相柱。
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