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共創(chuàng)共贏
蘇丹紅屬偶氮系列化工合成染料,并非食品添加劑,主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四種類型。對于食品中蘇丹紅的檢測,我國曾發(fā)布GB/T19681-2005食品中蘇丹紅染料的檢測方法液相色譜法國家標準。樣品經(jīng)溶劑提取、固相萃取凈化后,用反相液相色譜—紫外可見光檢測器進行色譜分析,采用外標法定量。
方法優(yōu)勢
火腿腸等肉制品樣品經(jīng)正己烷提取后,然后使用ProElutSDH蘇丹紅檢測固相萃取柱進行凈化,液相色譜法檢測。該方法參考國標方法進行樣品提取,凈化過程使用商品化的蘇丹紅檢測固相萃取柱,無需按照國標方法進行層析柱的填裝和中性氧化鋁的活度調(diào)整,避免了中性氧化鋁活度容易受環(huán)境影響而引起蘇丹紅回收率不穩(wěn)定的弊端,使用ProElutSDH蘇丹紅檢測固相萃取柱重現(xiàn)性和回收率結果更加穩(wěn)定可靠。方法檢出限是1μg/kg,優(yōu)于國標GB/T19681-2005要求zui低檢出限10μg/kg。
以下為詳細解決方案,敬請參考!
1、適用范圍
本方案適用于火腿腸等肉制品中蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ的檢測,方法檢出限是1μg/kg。
2、提取
(1)取5.0g樣品,加入5g無水硫酸鈉,攪勻,加入20mL正己烷混合,振蕩5min,超聲提取5min,8000rpm下離心2min,收集上清液
(2)將下層殘留物用20mL正己烷按照步驟(1)重復提取一次,合并兩次上清液;
(3)將上清液在40℃水浴條件下,減壓蒸至近干,再加入5mL正己烷混勻,待凈化。
3、凈化——ProElutSDH6mL(Cat.#65909)
a活化:
5mL正己烷活化;
b上樣:
加入待凈化液,棄去流出液;
c淋洗:
依次加入5mL正己烷,5mL1%乙酸乙酯正己烷,棄去流出液;
d洗脫:
加入10mL30%乙酸乙酯正己烷,收集流出液;
e重新溶解:
將洗脫液在40℃下減壓蒸餾近干,用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1mL,供HPLC分析。
4、色譜條件
色譜柱:DiamonsilC18(2),250mm×4.6mm,5μm(Cat#99603)
流速:1.0mL/min
進樣量:20μL
柱溫:40℃
檢測器:PDA518nm
流動相:A:0.2%磷酸水溶液B:乙腈
梯度設置
時間/Min. | 0 | 18 | 20 | 30 | 30.1 | 40 |
A(%) | 12 | 12 | 0 | 0 | 12 | 12 |
B(%) | 88 | 88 | 100 | 100 | 88 | 88 |
分析物 | 添加水平(mg/kg) | 回收率(%) |
蘇丹紅Ⅰ | 0.1 | 95.42 |
蘇丹紅Ⅱ | 0.1 | 96.94 |
蘇丹紅Ⅲ | 0.1 | 91.02 |
蘇丹紅Ⅳ | 0.1 | 90.75 |
分析物 | 添加水平(mg/kg) | 回收率(%) |
蘇丹紅Ⅰ | 0.1 | 95.66 |
蘇丹紅Ⅱ | 0.1 | 95.37 |
蘇丹紅Ⅲ | 0.1 | 89.96 |
蘇丹紅Ⅳ | 0.1 | 92.34 |
火腿腸中蘇丹紅染料的測定相關產(chǎn)品信息:
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65909 | 蘇丹紅檢測固相萃取柱 | 6 mL, 30/pk |
ProElut SDH | ||
65584 | ProElut Na2SO4 無水硫酸鈉 | 500 g |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6 mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵,無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 | 1/pk |
(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | ||
37177 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
37180 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
色譜柱及保護柱 | ||
99603 | 反相液相色譜柱 | 250 × 4.6 mm,5 μm |
Diamonsil C18(2) | ||
6201 | EasyGuard C18 保護柱套裝 | 10 × 4.0 |
1個柱套 + 2個柱芯 | ||
標準品 | ||
50P-C16986101 | 蘇丹紅Ⅰ[842-07-9] | 250 mg |
50P-C16986102 | 蘇丹紅Ⅱ[3118-97-6] | 250 mg |
50P-C16986103 | 蘇丹紅Ⅲ[85-86-9] | 250 mg |
50P-C16986104 | 蘇丹紅Ⅳ[85-83-6] | 250 mg |
HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50115 | 正己烷 HPLC級 | 4 L |
50104 | 乙酸乙酯 HPLC級 | 4 L |
50123 | 甲基叔丁基醚 HPLC級 | 4 L |
50133 | 磷酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色 | 50 孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
5323 | 樣品瓶(棕色/螺紋) | 2 mL, 100/pk |
5325 | 樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝) | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
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